Magnbinding á nukleínsýrum í spektrophotometers
Mælingar á kjarnsýrum er oftast notaður við litrófsmælir. Oligonucleotides, einstrengdur, tvístrengdur DNA, og RNA geta verið magnbundin í biðminni. Frásogshraði hámarks frásogstopps kjarnsýru er 260 nm. Hver kjamsýra hefur mismunandi sameindasamsetningu og hefur því mismunandi breytistuðla. Til að mæla mismunandi gerðir kjarnsýra, veldu samsvarandi stuðlinum fyrirfram. Til dæmis er gleypni 1OD jafngild 50 μg / ml dsDNA, 37 μg / ml ssDNA, 40 μg / ml RNA og 30 μg / ml Olig, í sömu röð. Gegn gleypni eftir prófunina er breytt með ofangreindum stuðlinum til að fá samsvarandi sýnatökustyrk. Áður en prófanir eru gerðar skaltu velja réttar málsmeðferðir, sláðu inn rúmmál stofnlausnarinnar og þynningarolíunnar og prófa lausnir og sýnislausnir. Hins vegar var tilraunin ekki auðveld. Óstöðugar lestur getur verið stærsti höfuðverkur fyrir tilraunir. Því hærra sem næmi tækisins er, því meiri sem sýnt er gleypni.
Í raun er hönnunarmarkmiðið og vinnandi meginreglan litrófsmælisins kleift að breyta gleypni í tilteknu bili, það er að tækið hefur ákveðna nákvæmni og nákvæmni. Svo sem eins og Eppendorf breytilegt nákvæmni ≤ 1,0% (1A). Niðurstöður þessara margra prófana eru mismunandi milli meðaltals 1,0% og eru allir eðlilegar. Að auki þarf einnig að taka tillit til eðlisefnafræðilegra eiginleika kjamsýrunnar, pH bólunnar til að leysa kjarnsýruna, jónstyrkinn osfrv.. Við prófunin mun of mikið styrkur jónanna einnig leiða til þess að lesa til renna sem TE, sem mun stórlega stöðva lesturinn. Þynntur styrkur sýnisins er einnig óverulegur þáttur: Vegna óhjákvæmilegs viðveru litla agna í sýninu, sérstaklega kjarnsýru sýnum. Tilvist þessara litla agna hefur áhrif á prófunina. Til þess að lágmarka áhrif agna á niðurstöðum prófunarinnar er nauðsynlegt að gleypa kjarnsýruna að vera að minnsta kosti 0,1 A og gleypni er helst 0,1-1,5 A. Á þessu sviði þarf ekki að vera loftbólur í blöndu, og það er engin sviflausn í efninu. Að öðru leyti gengur lestur kröftuglega; Nota skal sama litametriska bollann til að prófa eintakið og sýnið; annars er styrkur munurinn of stór; Umreikningsstuðullinn og sýnatökustuðullin eru þau sömu; The cuvette borinn við gluggann; rúmmál sýnisins skal ná meira en nauðsynlegt lágmarksrúmmál litabollsins, osfrv.
Til viðbótar við kjarnsýruþéttni sýnir litrófsmælirinn nokkrar mjög mikilvægu hlutföll samtímis til að sýna hreinleika sýnisins, svo sem A260 / A280 hlutfallið, í því skyni að meta hreinleika sýnisins frá frásogshraða próteinsins er 280 nm. Hrein sýni hafa hlutfall sem er meira en 1,8 (DNA) eða 2,0 (RNA). Ef hlutfallið er minna en 1,8 eða 2,0, gefur það til kynna að prótein eða fenól efni sé til staðar. A230 gefur til kynna að það séu nokkrar mengunarefni í sýninu, svo sem kolvetnum, peptíðum, fenólum osfrv. Hlutfall hreint kjarnsýru A260 / A230 er meiri en 2,0. A320 skynjar galla lausnarinnar og aðrar truflunarþættir. Hreint sýni, A320 er yfirleitt 0.
Fyrirtækið sérhæfir sig í sölu á litrófsmælum , velkomnum viðskiptavinum sem þurfa að hafa samráð og kaup, við munum veita þér einlæga þjónustu og gæðavöru, auk lægra verðs.
Netfang: info@sumerlab.com
Vefur: sumerinstrument.com